Функционализированный наноадсорбент для аффинного разделения белков

Фон

Простое разделение и очистка белков очень важны для биотрансформации ксенобиотиков, метаболизма лекарств, биосинтеза простагландинов и стероидных гормонов, а также деградации ароматических аминокислот [1,2,3,4,5,6]. Разделенные белки можно использовать для производства антигенов и вакцин, молекулярной иммунологии, структурных, биохимических и клеточно-биологических исследований. Глутатион S -трансфераза (GST) представляет собой основную группу изоферментов детоксикации, которые могут быть использованы в системе слияния генов GST и в области нацеливания на лекарственный эффект или в качестве опухолевых маркеров [7, 8]. В настоящее время для очистки различных белков доступны различные методы, такие как осаждение, хроматография, ультрафильтрация и диализ, и, в частности, аффинное разделение, основанное на естественном биологическом сродстве между биологическими макромолекулами и комплементарными лигандами, имеет исключительное значение [9,10,11,12 , 13,14]. Однако успешное производство и очистка полноразмерных, растворимых и природных гибридных белков все еще сдерживается различными препятствиями, такими как необходимость предварительной обработки для удаления клеточного дебриса и коллоидных примесей, относительно длительное время работы и растворимость белка. Эти недостатки, к счастью, можно было преодолеть, применяя наноматериалы, чтобы способствовать разделению и очистке целевых белков [15,16,17,18,19]. Например, магнитный SiO ₂ Нанокомпозит -NiO способен разделять белки, меченные His [20]. Тем не менее, у наноматериалов все еще есть короткие этапы в разделении различных белков, потому что они часто неактивны для методов визуализации и флуоресценции, которые могут использоваться в качестве чувствительных биомолекулярных и медицинских диагностических инструментов для борьбы с биологической войной [21,22,23]. В этом смысле совершенно необходимо найти наноматериалы с флуоресцентным откликом, чтобы способствовать их применению при разделении и очистке рекомбинантного белка, такого как глутатионпероксидаза 3 (GPX3).

Особое внимание мы уделяем наноразмерному SnO ₂ квантовые точки (КТ), поскольку SnO ₂ как полупроводник n-типа с широкой запрещенной зоной (3,6 эВ) с хорошей химической стабильностью и биосовместимостью демонстрирует оптическое поглощение в видимой области спектра. Здесь мы устанавливаем умный способ введения флуоресцентного SnO ₂ КТ на поверхность наносфер кремния (НС) в надежде получить желаемый SnO ₂ / SiO ₂ наноструктура с потенциальным применением при разделении и очистке белков, меченных GST. Во-первых, наносферы кремнезема, функционализированные тиолами (SiO ₂ -SH NS) были приготовлены гидротермальным путем. Результирующий SiO ₂ -SH NS были объединены с SnO ₂ квантовые точки для получения SiO ₂ / SnO ₂ композитные НС, обладающие явным поглощением флуоресценции. SiO ₂ / SnO ₂ NS были дополнительно модифицированы восстановленным глутатионом (GSH) для получения SiO ₂ / SnO ₂ -GSH NSs с потенциалом аффинного разделения GST-меченого белка. Способность и пероксидазная активность приготовленного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs при разделении GST-меченых белков оценивали с помощью анализа SDS-PAGE.

Экспериментальный

Материалы и методы

Бромид гексадецилтриметиламмония (CTAB), хлорид олова (IV) (SnCl ₄ ), триэтиламин (TEA) и изопропанол были предоставлены Tianjin Kermel Chemicals Reagent Company (Тяньцзинь, Китай). AgNO ₃ был приобретен у Tianjin Fuchen Technology Development Co., Ltd. (Тяньцзинь, Китай). 3-Меркаптопропил-триметоксисилан (MPS) был предложен компанией Alfa-Aesar (Шанхай, Китай). Тетраэтилортосиликат (TEOS) был поставлен Tianjin Fuchen Chemicals (Тяньцзинь, Китай). Дигидроникотинамидадениндинуклеидфосфат (НАДФН), тиоредоксин и тиоредоксинредуктаза были получены от Sigma (Пекин, Китай). Глутатион-сефароза 4B (Стокгольм, США) был получен от GE Healthcare. Дитиотреитол (DTT) был доступен от Aladdin Industrial Corporation (Inalco SPA, Италия). Все химические реагенты были аналитическими и использовались без дополнительной очистки.

Подготовка SnO ₂ Квантовые точки

В типичном синтезе [24] 3,5 г SnCl ₄ · 5H ₂ O был добавлен в 50 мл H ₂ . O, затем к раствору при перемешивании добавляли 5 мл аммиака. Затем осадок, полученный центрифугированием, несколько раз промывали деионизированной водой для удаления избытка Cl ^- ионы. К полученному осадку добавляли тридцать миллилитров деионизированной воды, а затем pH раствора доводили до 12 с помощью 2 моль / л аммиака. Смешанный раствор переносили в автоклав из нержавеющей стали с тефлоновым покрытием, герметично закрывали и нагревали при 150 ° C в течение 24 часов. По завершении нагревания смешанный раствор охлаждали, центрифугировали и полностью промывали смесью этанол-изопропанол (объемное соотношение 1:1) с получением SnO ₂ QD.

Подготовка SnO ₂ / SiO ₂ -SH NS

При обычном синтезе 0,2 г SnO ₂ КТ и 0,09 г ЦТАБ растворяли в смешанном растворителе H ₂ . O (42,5 мл) и абсолютный спирт (7 мл) при перемешивании на магнитной мешалке (200 G, r =180 мм). К полученному раствору добавляли 2,7 мл ТЭА при дополнительных 20 мин перемешивания. Смешанный раствор нагревали при 60 ° C в течение 5 часов, при этом медленно добавляли 3,5 мл TEOS и 0,35 мл MPS с последующим центрифугированием (12 800 G, r =180 мм) и полной промывкой HCl-этанолом (30 мл) и водой (30 мл) с получением SnO ₂ / SiO ₂ -SH NSs для трехкратного диспергирования в воде (0,12 г / мл).

Модификация поверхности SnO ₂ / SiO ₂ -SH NS

Четыре миллилитра 0,12 г / мл SnO ₂ / SiO ₂ -SH NS трижды промывали PBS (0,01 моль / л, pH =7,4). Эти SnO ₂ / SiO ₂ -SH NS добавляли в 30 мл раствора GSH с концентрацией 16,7 мг / мл и колебали при 37 ° C в течение 24 часов (120 об / мин) с помощью осциллятора постоянной температуры. В конце осцилляции смешанный раствор центрифугировали, чтобы получить SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs; затем осадок полностью промывали 30 мл PBS (0,01 моль / л, pH =7,4) три раза для удаления избыточного GSH посредством физической адсорбции, тем самым получая желаемый SnO ₂ / SiO ₂ -ГШ НС. Результирующий SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS добавляли в спирт (25%, v / v ) и хранили при 4 ° C.

Разделение белков с тегами GST

Смешанные белки собирали из клеточного лизата Escherichia coli . , который происходит путем лизиса воды (концентрация 0,01 моль / л, pH 7,4). Для экспрессии белка in vitro область белка, содержащая кодирующую последовательность глутатионпероксидазы 3 (GPX3, аминокислоты 37–206), открытых устьиц 1 (OST1) и нечувствительности к АБК 2 (ABI2, аминокислоты 100–423) в Arabidopsis thaliana был клонирован и вставлен в рамку в плазмиду pGEX-6p1 (GPX3 использовался в качестве контроля). Конструкции pGEX-GPX3, pGEX-OST1 и pGEX-ABI2 вводили в E. coli Клетки BL21 (DE3). Рекомбинантные GST-меченые белки очищали с использованием глутатион-сефарозы 4B и SnO ₂ . / SiO ₂ -ГШ НС. Праймеры, использованные для клонирования генов, были следующими:для GPX3, прямой праймер, 5'-GATGGATCCTCGCCATCGACGGTGGAACAA-3 '; обратный праймер, 5'- CACCTCGAGTCAAGCAGATGCCAATAGCTT-3 '; для OST1, прямой праймер, 5'- GCCGAATTCATGGATCGACCAGCAGTGA-3 '; обратный праймер, 5'-CCCGTCGACTCACATTGCGTACACAATC-3 '; для ABI2, прямой праймер, 5'- GCGGAATTCGAGAGTAGAAGTCTGTTTG-3 '; обратный праймер, 5'- GCGCTCGAGTCAATTCAAGGATTTGCTC-3 '.

После промывания раствором PBS (0,01 моль / л, pH =7,4) приготовленный SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS вводили непосредственно в 1000 мкл E. coli лизат и встряхивают при 4 ° C в течение 2 часов (скорость вращения:90 об / мин), чтобы SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs для захвата GST-меченых белков. По завершении встряхивания эти NS выделяли из раствора центрифугированием и полностью промывали раствором PBS для удаления любых остаточных не захваченных белков. SnO, связанный с белком, меченный GST ₂ / SiO ₂ -GSH NS промывали 300 мкл и 0,5 моль / л раствора GSH трижды, чтобы отделить GST-меченные белки от их поверхности. Отдельно собранные белковые растворы детектировали электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE). Концентрацию разделенных белков определяли с помощью набора для анализа белков BCA. SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS могут быть повторно использованы для разделения целевых белков несколько раз одним и тем же методом.

Измерение активности глутатионпероксидазы

Выделенную активность GPX3 измеряли спектрометрическим определением потребления НАДФН при 340 нм, как описано Delaunay et al. [25]. Тег GST был отрезан протеазой PreScission от GST-тегированного GPX3, а затем GPX3 был использован для анализа активности. Во-первых, 98 мкл реакционного буферного раствора (включая 100 ммоль / л Трис-Cl, 0,3 ммоль / л НАДФН, 1,34 мкмоль / л тиоредоксин и 0,18 мкмоль / л тиоредоксинредуктазы из E. coli лизат) добавляли в пробирку; после полного перемешивания к полученному буферному раствору реакции добавляли 1,35 мкмоль очищенного GPX3. Затем смешанный раствор добавляли в 2 мкл H ₂ . О ₂ (5 ммоль / л) для инициирования реакции и потребление НАДФН при 340 нм собирали спектрометрическим определением.

Анализ окислительно-восстановительных состояний очищенного GPX3

Тег GST был отрезан от меченного GST GPX3 протеазой PreScission. Отделенный GPX3 обрабатывали 5 ммоль / л H ₂ . О ₂ и 1 ммоль / л DTT в течение 10 мин для изменения окислительно-восстановительных состояний очищенного GPX3. Полученный GPX3 использовали для анализа окислительно-восстановительных состояний in vitro. Экстракты оценивали по невосстановлению 15% геля SDS-PAGE.

Характеристика

Морфология и состав приготовленного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS анализировали с помощью просвечивающей электронной микроскопии (TEM, JEM-2010, Япония), сканирующей электронной микроскопии (SEM, JSM 5600LV, Япония), рентгеновской дифракции (XRD, X 'Pert Philips, Голландия) и флуоресцентного спектрометра ( FL, FluoroSENS, Великобритания, при длине волны возбуждения 260 нм). Разделенные GST-меченые белки детектировали с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE, Power PAC 300, Китай) при напряжении предварительного концентрирования 70 В и напряжении разделения 120 В. Генератор постоянной температуры был от Shanghai ChemStar Instruments , Co., Ltd. (АТС-03М2Р, Китай). Концентрацию разделенных белков определяли с помощью набора для анализа белков BCA (Beijing CoWin Biotech, Китай).

Результаты и обсуждение

ТЕМ, SEM, XRD и флуоресцентный анализ SnO ₂ КТ и SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS

На рисунке 1 представлены изображения ПЭМ высокого разрешения (ПЭМВР) и рентгенограмма синтезированного SnO ₂ . КТ. Видно, что синтезированный SnO ₂ КТ имеют сферическую форму и средний диаметр 5 нм, что демонстрирует узкое распределение частиц по размерам (рис. 1а), а их шаг решетки в плоскости (110) составляет 0,29 нм (рис. 1б). Изображение решетки с хорошим разрешением демонстрирует, что подготовленный SnO ₂ КТ имеют высокоупорядоченную кристаллическую структуру. Соответствующая выбранная область электронограммы SnO ₂ Квантовые точки (рис. 1c) могут быть отнесены к одной фазе касситерита, что согласуется с соответствующей картиной XRD (рис. 1d). А именно, характеристические пики при 2 тета =26,6 ° (110), 33,9 ° (101), 38,0 ° (200), 51,8 ° (211), 65,9 ° (301) и 78,7 ° (321) соответствуют стандарту. Данные XRD касситерита SnO ₂ (Карта JCPDS № 41-1445). Кроме того, интенсивные пики XRD указывают на то, что приготовленный SnO ₂ КТ хорошо кристаллизованы, и отсутствие других характерных пиков предполагает, что они не содержат примесей гематита или гидроксидов.

ТЕА ( а ), HRTEM ( b ) изображения, электронограмма выбранной области ( c ) и рентгенограмма ( d ) подготовленного SnO ₂ QD

На рисунке 2 представлены изображения SnO ₂ , полученные с помощью СЭМ и ПЭМ. / SiO ₂ -ГШ НС. Видно, что подготовленный SnO ₂ / SiO ₂ НС -ГШ имеют сферическую форму и средний диаметр около 430 нм, а их поверхность кажется несколько шероховатой (рис. 2а, б). Между тем видно, что SnO ₂ КТ (около 5–15 нм) модифицированы на поверхности SiO ₂ микросфер (рис. 2в, г), что согласуется с соответствующими изображениями СЭМ. Указывается, что SnO ₂ и кремнеземные НП были агрегированы.

SEM ( a , b ) и ТЕА ( c , d ) изображения подготовленного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS

На рис. 3а представлена ​​рентгенограмма синтезированного SnO ₂ . / SiO ₂ -ГШ НС. Основные пики при 2 тета =110 °, 101 °, 200 °, 211 °, 301 ° и 321 ° соответствуют пикам SnO ₂ (Рис. 1d). Кроме того, SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS демонстрируют интенсивный характерный пик аморфного кремнезема около 23 ° (карта JCPDS № 76-0933), что указывает на то, что SnO ₂ обладающий видимым световым откликом, был успешно введен на поверхность SiO ₂ NS. На рисунке 3b показан флуоресцентный спектр SnO ₂ . / SiO ₂ -GSH NSs на длине волны 368 нм. Видно, что SnO ₂ / SiO ₂ -GSH демонстрирует интенсивное флуоресцентное излучение, связанное с кислородными вакансиями SnO ₂ . На рис. 3с представлена ​​флуоресцентная визуализация SnO ₂ . / SiO ₂ -GSH NS, когда эти NS используются для разделения GPX3 с тегами GST в E. катушка лизат. Видно, что есть явная зеленая флуоресценция там, где приготовленный SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS используются. Это означает, что SnO ₂ был модифицирован на поверхности SiO ₂ и SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS обладают хорошими флуоресцентными свойствами.

Диаграмма XRD ( a ), спектр флуоресценции (б ) и флуоресцентной визуализации ( c ) подготовленного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS

Анализ SDS-PAGE

Оценить способность приготовленного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs при разделении GST-меченых белков, мы провели SDS-PAGE анализ. На рисунке 4 показан результат анализа SDS-PAGE GPX3 с GST-тегами, разделенных SnO ₂ . / SiO ₂ -ГШ НС. Видно, что SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS могут эффективно обогащать целевые белки из E. coli лизата и, в частности, количество диссоциированных белков имеет тенденцию к увеличению с увеличением концентрации GSH в диапазоне 10–100 ммоль / л (дорожки 3–6 на рис. 4a). Понятно, что целевые белки могут быть разделены специально приготовленным SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS от E. coli лизата и почти не было неспецифических.

SDS-PAGE анализ очищенных GST-меченых белков, разделенных SnO ₂ / SiO ₂ -ГШ НС. а Дорожка 1, маркер; дорожка 2, E. coli лизат; дорожки 3–6 относятся к фракциям, вымытым из SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS с различными концентрациями раствора GSH (дорожка 1, 10 ммоль / л; дорожка 2, 20 ммоль / л; дорожка 3, 50 ммоль / л; дорожка 4, 100 ммоль / л). б Дорожка 1, маркер; дорожка 2, E. coli лизат; переулок 3, 1-е отделение; полоса 4, 2-е отделение; полоса 5, 3-е отделение; и полоса 6, фракции, смытые с глутатион-сефарозы 4B

Для исследования повторно используемых свойств подготовленного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS, мы неоднократно использовали их для разделения GPX3 с тегами GST. Как показано на фиг. 4b (дорожка 1 относится к маркеру, дорожка 2 относится к GST-GPX3-содержащим E. coli лизат, полоса 3 относится к 1-му разделению, полоса 4 относится к 2-му разделению, полоса 5 относится к 3-му разделению и полоса 6 относится к фракциям, отмытым от глутатион-сефарозы 4B), синтезированного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS проявляют особую избирательность по отношению к GPX3 с тегами GST, извлеченным из E. coli лизат, и их специфичность и сродство остаются неизменными после трех циклов повторного разделения.

Для проверки универсальности синтезированного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs для очистки GST-меченых белков, мы выбрали три вида GST-меченых белков (GST-тегированный GPX3, GST-тегированный OST1 и GST-тегированный ABI2) для проведения экспериментов. Как показано на рис. 5, GST-тегированные белки GPX3, OST1 и ABI2 могут быть специфически разделены SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS от E. coli лизат (дорожки 3, 6, 9); тогда мы можем получить оба GPX3 (отрезать тег GST от SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs, связывающие GST-тегированный GPX3) и GST-тег, элюированный из SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS (дорожка 13, GPX3; дорожка 14, тег GST), которые имеют аналогичный эффект с глутатион-сефарозой 4B (дорожки 2, 5, 8, 11, 12). Концентрации очищенных белков SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS составляли 7,4 мг / г (GST-тегированный GPX3), 7,1 мг / г (GST-тегированный OST1) и 6,8 мг / г (GST-тегированный ABI2), что указывает на то, что SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS хороши для очистки GST-меченых белков из E. coli лизат. Для сравнения связывающей способности приготовленных SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS и другой материал, глутатион-сефароза 4B (приобретенный в Стокгольме, США), использовали в качестве материала для сравнительного эксперимента. Общие белки, очищенные глутатион-сефарозой 4B, составляли 7,1 мг / мл (GST-меченный GPX3), 6,9 мг / мл (GST-меченный OST1) и 5,6 мг / мл (GST-меченный ABI2), соответственно. Видно, что связывающая способность приготовленного SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs выше, чем у товарной 4B.

SDS-PAGE анализ очищенных рекомбинантных белков GPX3, OST1 и ABI2. Дорожки 1, 4 и 7, E. coli лизат; дорожки 2, 5 и 8, белки, элюированные из коммерческой глутатион-сефарозы 4B (GE Healthcare, США); дорожки 3, 6 и 9, белки, элюированные из SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs; дорожка 10, маркер; дорожки 11 и 13, GPX3, полученный после отсечения GST-метки от глутатион-сефарозы 4B, связанной с GST-GPX3 и SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS привязаны к GPX3 с тегами GST; дорожки 12 и 14, GST-метка, элюированная из глутатион-сефарозы 4B и SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS

Анализ окислительно-восстановительного состояния и пероксидазной активности GPX3 с GST-тегами

Для анализа окислительно-восстановительного состояния и активности GST-тегированного GPX3, разделенного подготовленным SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS, мы отрезаем GST-тег, чтобы получить разделенный GPX3. На рис. 6а показаны данные анализов окислительно-восстановительного состояния GPX3 in vitro (соответствующие типичному гелю из трех независимых экспериментов). Дорожки 1 и 2 относятся к GPX3, полученному после отсечения GST-метки от глутатион-сефарозы 4B, связанного с GST-меченным GPX3 (полоса 1 представляет собой окисленный GPX3, а полоса 2 представляет собой восстановленный GPX3); дорожки 3 и 4 относятся к GPX3, полученному после отсечения тега GST от SnO ₂ / SiO ₂ -GSH-связанный GST-меченный GPX3 (дорожка 3 представляет собой окисленный GPX3, а дорожка 4 представляет собой восстановленный GPX3); дорожка 5 относится к маркеру. Как показано на фиг. 6a, очищенный GPX3 отделен от глутатион-сефарозы 4B (дорожки 1 и 2) и SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS (дорожки 3 и 4) имеют окисленное и восстановленное состояния, и восстановленный GPX3 мигрирует медленнее, чем окисленный аналог. Это хорошо согласуется с нашими предыдущими выводами о том, что GPX3 присутствует в окисленном и восстановленном состояниях in vitro, и его восстановленные и окисленные формы могут быть разделены в результате модификации восстановленных остатков Cys [26,27,28].>

а Анализ окислительно-восстановительного состояния GPX3 in vitro:дорожки 1 и 3 (окисленный GPX3) и 2 и 4 (восстановленный GPX3) относятся к GPX3, полученному после отсечения GST-метки от глутатион-сефарозы 4B и SnO ₂ / SiO ₂ -GSH связанный GST-tagged GPX3, соответственно; переулок 5, маркер. б Анализы активности пероксидазы GPX3

На рисунке 6b показаны анализы пероксидазной активности GPX3:линия GPX3 *, полный анализ очищенного GPX3 в присутствии глутатион-сефарозы 4B, тиоредоксина, тиоредоксинредуктазы, NADPH и H ₂ О ₂ ; линия GPX3, полная реакция среди SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS разделяют GPX3, тиоредоксин, тиоредоксинредуктазу, NADPH и H ₂ О ₂ ; линия Нет GPX3, полная реакция при отсутствии GPX3; и линия № Trx - полная реакция в отсутствие тиоредоксина. На рисунке 6b показана глутатионпероксидазная активность очищенного GPX3, отделенного от глутатион-сефарозы 4B и SnO ₂ . / SiO ₂ -GSH NSs in vitro. Можно видеть, что с тиоредоксином в качестве субстрата очищенный GPX3 проявляет значительную пероксидазную активность, что указывает на то, что GPX3 отделен от SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs существует в естественном состоянии.

Выводы

Установлен простой способ изготовления SnO ₂ , защищенного кремнеземом. Наносферы КТ (SnO ₂ / SiO ₂ NS). SnO ₂ / SiO ₂ НС дополнительно модифицируются глутатионом с образованием SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NS для аффинного разделения глутатиона S -трансферазный (GST-меченный) рекомбинантный белок. Результаты показывают, что с точки зрения способности разделять GPX3 с тегами GST, LOV с тегами GST и ABI2 с тегами GST, подготовленный SiO ₂ / SiO ₂ -GSH NS демонстрируют специфическое разделение, высокую концентрацию связывания с белками и хорошие повторно используемые свойства. Кроме того, GPX3, отделенный от GST-тегированного GPX3, сохраняет свое окислительно-восстановительное состояние in vitro и активность GPX, что означает, что приготовленный SnO ₂ / SiO ₂ -GSH NSs могут иметь многообещающий потенциал для быстрого разделения и очистки белков, меченных GST.

Сокращения

ABI2:

Нечувствительность к ABA 2

CTAB:

Гексадецилтриметиламмоний бромид

DTT:

Дитиотреитол

GPX3:

Пероксидазная активность глутатионпероксидазы 3

GSH:

Сниженный глутатион

с тегами GST:

Глутатион S -transferase-tagged

MPS:

3-меркаптопропилтриметоксисилан

NADPH:

Дигидроникотинамидадениндинуклектидфосфат

OST1:

Открытые устьица 1

QD:

Квантовые точки

SDS-PAGE:

Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия

SEM:

Сканирующая электронная микроскопия

SiO ₂ -SH NS:

Наносферы кремнезема, функционализированные тиолами

SnCl ₄ :

Хлорид олова (IV)

ЧАЙ:

Триэтиламин

ТЕМ:

Просвечивающая электронная микроскопия

TEOS:

Тетраэтилортосиликат

XRD:

Рентгеновская дифракция